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非編碼RNA研究您當(dāng)前的位置:首頁(yè) >> 技術(shù)服務(wù) >>  非編碼RNA研究

慢病毒(Lentivirus)是一類(lèi)改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒載體,基因組為RNA,對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。 慢病毒基因組進(jìn)入細(xì)胞后,DNA整合到細(xì)胞基因組中。慢病毒介導(dǎo)的基因表達(dá)或小RNA干擾作用持續(xù)且穩(wěn)定,隨細(xì)胞基因組的分裂而分裂。

紐赫生物慢病毒的生產(chǎn)和指控采取了國(guó)際學(xué)術(shù)界公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)流程,采用三質(zhì)粒系統(tǒng)在293FT細(xì)胞中進(jìn)行包裝。所獲得的病毒顆粒經(jīng)過(guò)超速離心純化,并通過(guò)熒光發(fā)對(duì)病毒基因拷貝進(jìn)行滴定。一般情況下我們的慢病毒的滴度在108~109TU/ml,完全可以滿(mǎn)足各類(lèi)實(shí)驗(yàn)的使用要求。

慢病毒生產(chǎn)流程

step 1 慢病毒質(zhì)粒構(gòu)建及大量抽提

step 2 慢病毒骨架質(zhì)粒與包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞

step 3 病毒收集與濃縮

step 4 滴度測(cè)定

慢病毒感染細(xì)胞時(shí),由于細(xì)胞的來(lái)源、代數(shù)和細(xì)胞狀態(tài)等因素的影響,MOI值在不同實(shí)驗(yàn)室也略有差異,下面我們提供公司部分細(xì)胞的慢病毒MOI感染參數(shù),供實(shí)驗(yàn)參考(以下數(shù)據(jù)是細(xì)胞感染效率在80%細(xì)胞狀態(tài)良好的情況下獲得的):

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